КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНИ ВИЛЬСОНА-КОНОВАЛОВА

Введение. Клиническая картина болезни Вильсона-Коновалова (БВК) характеризуется выраженным полиморфизмом, а классические лабораторные исследования часто не позволяют поставить диагноз. Наиболее достоверным способом подтверждения БВК является определение мутаций в гене ATP7B. Материалы и методы. В ходе исследования был разработан метод генетической диагностики, включающий в себя проведение ПЦР в реальном времени для определения точечной мутации в сочетании с фрагментным анализом для выявления делеций и инсерций. В исследовании приняли участие пациенты с диагнозом БВК, который был поставлен на основании клинико-лабораторных критериев заболевания согласно бальной Лейпцигской шкале (1-я группа, n=20). Для разработки методики выявления мутаций в гене ATP7B, наиболее распространенных в российской популяции, была собрана группа пациентов с уже известными мутациями (2-я группа, n=3). У всех пациентов было проведено генотипирование с помощью разработанной методики. Для 12 пациентов были собраны анамнестические, клинические и лабораторные данные. Результаты. У пациентов из 1-й группы были выявлены следующие аберрации: гетерозиготные мутации по H1069Q (60%), гомозиготные мутации по H1069Q (30%), сочетание мутаций 3627_3630del.4/ H1069Q в гетерозиготной форме (5%), сочетание мутаций 1770insT/H1069Q в гетерозиготной форме (5%). Обсуждение. Клинический симптомокомплекс БВК не является строго очерченным, а типичное для БВК сочетание поражения печени и нервной системы, колец Кайзера-Флейшера присутствует далеко не у всех больных или появляется уже на поздних стадиях заболевания. Наличие значительного количества ложноотрицательных результатов лабораторных маркеров БВК говорит о недостаточной чувствительности данных методов исследования. Вариабельность клинических и лабораторных маркеров БВК задерживает постановку этиологического диагноза и начало патогенетической терапии. Вывод. Разработанный метод генетической диагностики БВК рекомендуется проводить у всех пациентов российской популяции с подозрением на печеночную, неврологическую или смешанную форму БВК с целью своевременной постановки диагноза и начала лечения.

1. P de Bie, P Muller, C Wijmenga, L W J Klomp Molecular pathogenesis of Wilson and Menkes disease: correlation of mutations with molecular defects and disease phenotypes. Journal of Medical Genetics. 2007;44(11):673-688. DOI: 10.1136/ jmg.2007.052746.

2. Ala A., Walker A.P., Ashkan K., Dooley J.S., Schilsky M.L. Wilson’s disease. The Lancet. 2007;369 (9559):397-408. DOI: 10.1016/S0140-6736(07)60196-2.

3. Баязутдинова Г.М., Щагина О.А. Молекулярный патогенез болезни Вильсона-Коновалова. Медицинская генетика. 2017;16(7):8-24.

4. Голубева В.В., Мазурчик Н.В., Гарабова Н.И., Ноздрюхина Н.В., Струценко А.А. Два случая болезни Вильсона-Коновалова. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2013;(3):41–46.. DOI: 10.14412/2074-2711-2013-2339.

5. Lutsenko S., Barnes N.L., Bartee M.Y. and Dmitriev O.Y. Function and regulation of human copper-transporting ATPases. Physiological Reviews. 2007;87(3):1011-1046. DOI: 10.1152/ physrev.00004.2006.

6. Балашова М.С., Соловьева О.В., Фастовец С.В., Тулузановская И.Г., Филимонов М.И., Баязутдинова Г.М. и др. Клиническая ценность секвенирования гена АТР7В в диагностике болезни Вильсона-Коновалова. Медицинская генетика. 2016;15(7):14-16. DOI: 10.1234/ XXXX-XXXX-2016-7-14-16.

7. Panagiotakaki E., Tzetis M., Manolaki N., Loudianos G., Athanasios P., Manesis E. et al. Genotype–Phenotype Correlations for a Wide Spectrum of Mutations in the Wilson Disease Gene (ATP7B). American Journal of Medical Genetics. 2004; 131A (2):168-173. DOI: 10.1002/ajmg.a.30345.

8. Stapelbroek J., Bollen C., van Amstel P., van Erpecum K., van Hattum J., van den Berg L., Klomp L., Houwen R. The H1069Q mutation in ATP7B is associated with late and neurologic presentation in Wilson disease: results of a meta-analysis. Journal of Hepatology. 2004;41(5):758–763. DOI: 10.1016/j. jhep.2004.07.017.

9. Ferenci P. Regional distribution of mutations of the ATP7B gene in patients with Wilson Disease: impact on genetic testing. Human Genetics. 2006;120(2):151-159. DOI: 10.1007/s00439-006-0202-5.

10. Еремина Е.Ю. Болезнь Вильсона-Коновалова. Вестник современной клинической медицины. 2011;4(1):38-46.

11. Gow P.J., Smallwood R.A., Angus P.W, Smith A.L, Wall A.J., Sewell R.B. Diagnosis of Wilson’s disease: an experience over three Decades. Gut. 2000;46(3):415-419. DOI: 10.1136/ gut.46.3.415.

12. Perri R.E., Hahn S.H., Ferber M.J., Kamath P.S. Wilson Diseasekeeping the bar for diagnosis raised. Hepatology.2005;42(4):974. DOI: 10.1002/hep.20893.

13. Козлова Н.М., Гвак К.В., Гаджибалаева Л.Ш. Болезнь Вильсона-Коновалова. Сибирский медицинский журнал. 2011;104(5):125-129.

14. Ferenci P., Caca K., Loudianos G., Mieli-Vergani G., Tanner S., Sternlieb I., Schilsky M., Cox D., Berr F. Diagnosis and phenotypic classification of Wilson disease. Liver International. 2003;23(3):139-142. DOI: 10.1034/j.1600-0676.2003.00824.x.

15. Roberts E.A., Schilsky M.L. A practice guideline on Wilson disease. Hepatology. 2003;37(6):1475-1492. DOI: 10.1053/ jhep.2003.50252.

16. Tanzi R.E., Petrukhin K., Chernov I., Pellecuer J.L., Wasco W., Ross B. et al. The Wilson disease gene is a copper transporting ATPase with homology to the Menkes disease gene. Nature Genetics. 1993;5(4):344-350. DOI: 10.1038/ng1293-344.

17. Walshe J.M. Wilson’s disease: the importance of measuring serum caeruloplasmin non-immunologically. Annals of Clinical Biochemistry: International Journal of Laboratory Medicine. 2003;40(2):115-121. DOI: 10.1258/000456303763046021.

18. Jawdat N. Gaaib, Adnan F. Nassief. And Akeel H. Al-Assi Simple salting – out method for genomic DNA extraction from whole blood. Tikrit Journal of Pure Science. 2011;16(2):1813-662.

19. Баязутдинова Г.М., Щагина О.А., Поляков А.В. Мутация с.3207C>A гена АТР7В – наиболее частая причина гепатолентикулярной дегенерации в России: частота и причина распространения. Медицинская генетика. 2018;17(4):25-30. DOI: 10.25557/2073-7998.2018.04.25-30.

20. Асанов А.Ю., Соколов А.А., Волгина С.Я., Горячева Л.Г., Густов А.В, Иванова-Смоленская И.А. и др. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению болезни Вильсона-Коновалова (гепатолентикулярная дегенерация). Москва – 2015:5-71

21. Ferenci P., Czlonkowska A., Stremmel W., Houwen R., Rosenberg W., Schilsky M.. EASL Clinical Practice Guidelines: Wilson’s disease. Journal of Hepatology. 2012;56 (3):671-685. DOI: 10.1016/j.jhep.2011.11.007.

22. Залялова З.А. Современные подходы к диагностике и лечению болезни Вильсона-Коновалова. Казанский медицинский журнал. 2003;82(2):154-155.

23. Pilloni L., Lecca S., Coni P., Demelia L., Pilleri G., Spiga E. et al. Wilson’s disease with late onset. Digestive and Liver Disease. 2000;32(2):180. DOI: 10.1016/S1590-8658(00)80408-9.

24. Мищенко Т.С., Волошин-Гапонов И.К. Современные аспекты болезни Вильсона. Международный неврологический журнал. 2015;2(72):20-23.

25. Егорова А.Т., Базина М.И., Маисеенко Д.А., Киселева Е.Ю., Царюк Е.П. Болезнь Вильсона-Коновалова и беременность. Сибирское медицинское обозрение. 2014;1(85):89-92.

26. Sharma S., Toppo A., Rath B., Harbhajanka A., Lalita Jyotsna P. Hemolytic Anemia as a Presenting Feature of Wilson’s Disease. Indian Journal of Hematology and Blood Transfusion. 2010;26(3):101–102. DOI: 10.1007/s12288-010-0034-2.

27. Мельникова М.Ю., Федорова Т.Ф., Лобзин С.В., Панина Е.Б., Стельмах В.В., Некрасова А.С. и др. Геморрагический синдром при гепатолентикулярной дегенерации: клинические особенности. Неврологический журнал. 2014;19(6): 23-30.

28. Баранов А.А., Намазова-Баранова Л.С., Потапов А.С., Полякова С.И., Цымбалова Е.Г., Четкина Т.С. и др. Федеральные клинические рекомендации по оказанию медицинской помощи детям с болезнью Вильсона. Москва – 2015: 3-21.

29. Сухарева Г.В. Гепатолентикулярная дегенерация и варианты поражения печени. Лечение и профилактика. 2012;2(3):36-41.

30. Денисова М.Ф., Донде С.М., Дыба М.Б., Музыка Н.Н., Реминная Н.Т., Чернега Н.В. Клинические варианты печеночной формы болезни Вильсона-Коновалова у детей. Перинатология и педиатрия. 2013;3(55):70-73.